產(chǎn)地 | 上海 |
保存條件 | 2-8℃ |
品牌 | 睿創(chuàng) |
貨號 | RC-E110634A |
用途 | 科研實驗 |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
保質(zhì)期 | 6個月 |
適應(yīng)物種 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細胞,土壤等動植物 |
檢測限 | 詳詢 |
數(shù)量 | 99 |
包裝規(guī)格 | 96T/48T |
標記物 | HRP標記物 |
樣本 | 血清,血漿,唾液,尿液,組織,細胞上清,裂解液等 |
應(yīng)用 | 定性/定量/酶活檢測 |
是否進口 | 否 |
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
人布病抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被布病抗體(Brucellosis-Ab)抗原的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并che底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中布病抗體(Brucellosis-Ab)的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
檢測樣本:48T檢測42個樣本,96T檢測90個樣本
特色服務(wù):提供免費代測,技術(shù)一對一指導(dǎo)。
檢測樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
適應(yīng)物種:人,大鼠,小鼠,植物,狗,貓,蝦,魚,蟹,牛,羊,微生物,細胞,土壤等動植物
實驗須知:我司ELISA檢測試劑盒現(xiàn)制備僅供科研實驗,不得用于其他用途;使用前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書
自備物品
1.酶標儀(450nm)
2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取50μL加樣即可。
4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
人布病抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2.自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;
3.待測樣本孔加待測樣本50μL;
4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
1. 試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;
陰性對照孔OD值平均值≤0.15。
2. 臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),樣品為陰性
4. 陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off),樣品為陽性
試劑盒性能
1.準確性:陽性對照孔OD值平均值≥1.00;陰性對照孔OD值平均值≤0.15,說明試驗結(jié)果有效。
2.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
4.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
5.有效期:6個月
免責聲明
1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測 定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng) 而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行 定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
售前.后服務(wù)須知
* 價格問題:價格以本公司的實際報價為準;
* 產(chǎn)品問題:所有的商品我們公司在發(fā)貨之前都進行嚴格質(zhì)檢,確保無任何問題才發(fā)貨;
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* 訂購方法:款到發(fā)貨,如需要請傳資料,具體細節(jié)請詳詢;
* 運輸方式:順豐快遞;
* 質(zhì)優(yōu)價廉:歡迎訂購,產(chǎn)品量大價優(yōu);
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